古くから知られているDNAシークエンスには、大きく分けて「マキサム・ギルバート法」と「ジデオキシ法（サンガー法）」の２種類があります。今回は「マキサム・ギルバート法」について解説していきます。
1.マキサム・ギルバート法の原理
マキサム・ギルバート法とは、末端をRI（放射性同位体）標識したDNA溶液に「ジメチル硫酸（Gの前で切断）」「酸（GあるいはAの前で切断）」「ヒドラジン（CあるいはTの前で切断）」「ヒドラジン＋塩（Cの前で切断）」をそれぞれ加えることによって、DNAを特定の塩基において切断し、その後、ポリアクリルアミドゲル電気泳動でDNA断片を分離することによって、ジデオキシ法と同様の仕組みでDNAの塩基配列を解読することができます。
このとき、DNAの切断が１分子DNAあたり１個の割合で起こるようにすることで、各塩基において切断されたさまざまな鎖長のDNA断片（末端標識されたDNA断片）を得ることができます。
マキサム・ギルバート法は、試薬を加えることによって化学分解によりDNAを切断するという原理から「化学分解法」とも呼ばれています。この手法は、操作が煩雑な上、使用する試薬の危険性や反応効率の悪さなどから現在では「ジデオキシ法」を利用した自動化DNAシークエンス法の方が主流となっています。
※ジデオキシ法については「1)ジデオキシ法による塩基配列解析の原理と概要」で詳しく解説しています。
マキサム・ギルバート法（従来法）についてはこれで以上です。
次は「1)特定のRNAの検出と遺伝子発現の解析」について学んでいきましょう。
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1)特定のRNAの検出と遺伝子発現の解析
1)特定のRNAの検出と遺伝子発現の解析 特定のRNAを検出し、その遺伝子発現を調べるために最もよく使用される方法としては、 「リアルタイムPCR法」や「In situ ハイブリダイゼーション法」 が ...
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【参考】
