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1)特定のRNAの検出と遺伝子発現の解析
2023/1/22
1)特定のRNAの検出と遺伝子発現の解析 特定のRNAを検出し、その遺伝子発現を調べるために最もよく使用される方法としては、 「リアルタイムPCR法」や「In situ ハイブリダイゼーション法」 が ...
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3)酵母ツーハイブリッド法の原理と概要
2020/6/26
酵母ツーハイブリッド法とは 酵母ツーハイブリッド(Yeast Two-Hybrid )法は、酵母内に導入したレポーター遺伝子の転写活性化を指標に、タンパク質とタンパク質の相互作用(結合)を調べること ...
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2)共免疫沈降法(Co-IP)の原理と概要
2020/6/24
共免疫沈降(Co-IP)法とは 共免疫沈降(Co-Immunoprecipitation:Co-IP)法とは、あるタンパク質と相互作用(結合)している別のタンパク質に対する抗体を用いることで、タンパ ...
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1)クロマチン免疫沈降(ChIP)の原理と概要
2020/5/28
クロマチン免疫沈降(ChIP)法とは クロマチン免疫沈降(Chromatin Immunoprecipitation:ChIP)法とは、あるタンパク質に対する抗体(転写因子やヒストン化学修飾に対する ...
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プラスミドDNAの抽出
2020/5/15
プラスミドDNAの抽出 前項では「大腸菌の形質転換について」を学びました。本項では大腸菌を形質転換した後に行われる「プラスミドDNAの抽出」について学んでいきましょう。 1.アルカリ変性法の原理 「細 ...
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大腸菌の形質転換について
2020/5/13
大腸菌の形質転換について ここでは「大腸菌の形質転換」について学んでいきます。これらの操作は、例えば「ある遺伝子の機能を調べたいとき」に用いられるような「基本的な実験操作」となりますので、原理と流れ ...
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1)細胞や組織からのDNAやRNAの抽出
2020/5/11
細胞や組織からのDNAやRNAの抽出 「核酸の抽出」とは、細胞や組織などからDNAやRNAを取り出してくる操作のことを言います。ここでは、核酸を抽出する際によく用いられる手法である「フェノール・クロ ...
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2)マキサム・ギルバート法(従来法)
2018/12/23
古くから知られているDNAシークエンスには、大きく分けて「マキサム・ギルバート法」と「ジデオキシ法(サンガー法)」の2種類があります。今回は「マキサム・ギルバート法」について解説していきます。 1. ...
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2)RT-PCRによるRNAの検出
2018/12/23
1.RT-PCRとは RT-PCR(Reverse Transcription-PCR)とは、RNAを鋳型としてDNAを合成(これを逆転写といいます)した後に、特定のプライマーを用いたPCR法により ...
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1)ジデオキシ法による塩基配列解析の原理と概要
2018/12/22
PCRなどによって増幅したDNAは、「DNAシークエンス」と呼ばれる手法により、その塩基配列(A,T,G,Cの並び)を調べることができます。古くから知られているDNAシークエンスには、大きく分けて「 ...